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基于DNA步移机与电致化学发光方法检测Kras突变基因|澳门威尼娱乐官方网站

2020-10-28 00:27:02

澳门威尼娱乐官方网站_个体化医学因能获取更加有效地和精确的药物、增加药澳门威尼24848网址物的副作用、减少化疗成本,在癌症临床和化疗中具备最重要的应用于前景。检测与药物起到有关的基因有助为个体癌症患者获取用药的科学依据。

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研究指出,具备野生型鼠类肉瘤病毒癌基因(Kras)的结肠直肠癌(CRC)患者可获益于抗表皮生长因子受体(EGFR)的化疗,然而一旦Kras基因再次发生变异,患者则无法从抗EGFR化疗中受益。因此,Kras基因的检测可以检验出有EGFR靶向化疗药物有效地的结肠直肠癌患者,协助医生自由选择对肿瘤病人最有效地的化疗方法,构建肿瘤病人的个体化化疗。福州大学食品安全与生物分析教育部重点实验室的林振宇研究员课题组牵头福州大学生物科学与工程学院翁祖铨教授课题组建构了一个基于锁住核酸(LNA)功能化的DNA步移机和超强分支滚环扩充(HRCA)双重信号扩充技术的电化学闪烁(ECL)生物传感器,用作检测Kras突变基因。

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该传感器融合了LNA对单碱基变异的高辨识能力及步移机和HRCA低扩充效率的优点,构建了Kras突变基因低选择性和高灵敏度的检测。首先他们在磁珠上相连DNA基底链(SD)和步移链(DW)建构DNA步移机,SD与DW部分杂交并构成类似位点,在切刻内托酶的起到下,剪切类似位点并获释SD,同时DW与下一条SD杂交并剪切获释SD构成一个循环。为调控DNA步移,他们引进锁住核酸标记的探针(LMPP)对DW展开维护。锁住核酸的类似结构使其具备很好的辨识单碱基变异的能力。

当体系不存在目标物Kras突变基因时,该基因需要与LMPP杂交并启动DNA步移机,获释大量的SD,再行通过磁性分离出来,获释的SD被分离出来并作为HRCA的引物,启动时扩充反应。HRCA产物包括大量长度不一的双链DNA,利用Ru(phen)32+需要映射双链DNA中并产生ECL信号的特性,构建对目标物的灵敏检测。

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这一研究成果近期公开发表在ChemicalCommunications上,同时被选为外封面文章,文章的第一作者是福州大学博士研究生张莹。|澳门威尼娱乐官方网站。

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